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HE染色技術(shù)幾種常見(jiàn)的染色問(wèn)題

伊紅著(zhù)色方面:


      A.切片中央區域伊紅染色不均勻, 可能為弱堿性溶液殘留導致伊紅拒染所致。


      原因:伊紅染液的pH 值可能大于5 ;也可能是藍化液殘留過(guò)多;切片太??;或切片經(jīng)伊紅染色后在乙醇脫水時(shí)間過(guò)長(cháng)。


      對策:檢查伊紅染液的pH值,用乙酸將其調節在4.6-5.0 之間,使伊紅染色色彩艷麗;確保每次藍化后,用自來(lái)水沖洗干凈;檢查切片的厚度;脫水時(shí)不要讓切片在低濃度乙醇停留時(shí)間過(guò)長(cháng), 因為含水多的低濃度乙醇會(huì )將伊紅的顏色分化掉。


      B.伊紅深染導致細胞核與細胞質(zhì)沒(méi)有層次,缺乏對比度。


      原因:伊紅染色液濃度太高;切片在伊紅染色時(shí)間過(guò)長(cháng);切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時(shí)過(guò)快,而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生。

 

      對策:適當稀釋伊紅染色液,減少伊紅染色時(shí)間;或者使切片在乙醇脫水等步驟時(shí),停留時(shí)間相對均勻;檢查切片的厚度是否合適。


      (本文轉載網(wǎng)絡(luò ))

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