實(shí)驗步驟:
1.二甲苯中37℃脫蠟2次,15min/次。
2.無(wú)水乙醇浸泡2次,每次3min。
3.95%乙醇浸泡2次,每次3min。
4.PBS浸泡一次,3min。
5.2%DEPC水室溫下浸泡10min。
6.PBS浸泡10min。
7.0.2mol/L HCl浸泡30min。
8.PBS浸泡2次,每次3min。
9.滴加蛋白酶K(15ug/ml),37℃孵育15min。
10.0.1%甘氨酸處理5min。
11.4%多聚甲醛再次固定10min。
12.PBS清洗2次,每次5min。
13.0.1mol/L三乙醇胺-0.25%乙酸酐孵育10min。
14.SSC清洗2次,每次5min。
15.滴加預雜交液,上面蓋封口膜,使預雜交液不會(huì )干掉,隨后放入濕盒,40℃孵育1-2h。
(本文轉載網(wǎng)絡(luò ))