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切片預處理

實(shí)驗步驟:


      1.二甲苯中37℃脫蠟2次,15min/次。

      

      2.無(wú)水乙醇浸泡2次,每次3min。

      

     3.95%乙醇浸泡2次,每次3min。

      

      4.PBS浸泡一次,3min。

      

      5.2%DEPC水室溫下浸泡10min。

      

      6.PBS浸泡10min。

      

      7.0.2mol/L HCl浸泡30min。

      

      8.PBS浸泡2次,每次3min。

      

      9.滴加蛋白酶K15ug/ml),37℃孵育15min。

      

      10.0.1%甘氨酸處理5min。

      

      11.4%多聚甲醛再次固定10min。

      

      12.PBS清洗2次,每次5min。

      

      13.0.1mol/L三乙醇胺-0.25%乙酸酐孵育10min。

      

      14.SSC清洗2次,每次5min。

      

      15.滴加預雜交液,上面蓋封口膜,使預雜交液不會(huì )干掉,隨后放入濕盒,40℃孵育1-2h。


      (本文轉載網(wǎng)絡(luò ))

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