小鼠腸系膜微循環(huán)實(shí)驗
【目的】
1.學(xué)習動(dòng)物微循環(huán)顯微觀(guān)察方法。
2.觀(guān)察藥物對小鼠腸系膜微循環(huán)障礙的影響。
【原理】
借助微循環(huán)顯微觀(guān)察系統,直接觀(guān)察微血管特別是毛細血管的數量和形態(tài),血液特別是血細胞在血管內的流動(dòng)狀態(tài),以及毛血管周?chē)鸂顟B(tài),了解用藥前后腸系膜微循環(huán)的變化。
【器材】
顯微鏡或顯微錄像系統、冷光源、小鼠腸系膜觀(guān)察臺、恒溫 水浴 、手術(shù)器材、注射器等。
【藥品】
復方扶芳藤合劑(原液)不含糖醇提物、0.004%去甲腎上腺素(NA)、0.4%戊巴比妥鈉溶液
【動(dòng)物】
小白鼠
【方法】
1.選取禁食12h以上小鼠10只,體重20~22g,雌雄各半。
2.麻醉:0.4%戊巴比妥鈉溶液0.2ml/10g體重,ip。
3.手術(shù):腹部切開(kāi)一小口→輕輕拉出一段回腸→平鋪于特制的有機玻璃灌流小池上,內盛有37±1℃任臺氏液,以保持活體標本的恒溫、恒濕、恒pH和一定的離子濃度。
4.用顯微鏡放大100倍,選擇腸系膜微血管(選用毛細血管與1mm橫線(xiàn)相交點(diǎn))進(jìn)行觀(guān)察。
(1) 在視野下局部滴注NA 0.1ml造成微循環(huán)障礙。
(2) 在視野下局部滴注受試藥物0.1ml(對照組給予同體積的NS),觀(guān)察藥后血流速度的變化。
【結果 】
觀(guān)察微血管開(kāi)放時(shí)間( min)的變化,結果填入表4。本實(shí)驗對正常動(dòng)物微循環(huán)血液流速無(wú)明顯影響。
【注意 】
1、溫度對腸系膜微循環(huán)影響較大,應保持活體腸系膜標本在37±1℃。
2、腹部切口以1.5~2cm為宜,切口過(guò)大腸管易涌出影響觀(guān)察,切口過(guò)小尋找觀(guān)察部位不便且影響循環(huán)。
3、本實(shí)驗是觀(guān)察對正常小鼠微循環(huán)的影響,可預先復制微循環(huán)障礙動(dòng)物模型(Animal Models),觀(guān)察活血化瘀方藥對微循環(huán)障礙的影響。
(本文轉載丁香園)