放射自顯影技術(shù)是利用放射性同位素所產(chǎn)生的射線(xiàn)作用于感光乳膠的氯化銀晶體而產(chǎn)生潛影,再經(jīng)過(guò)顯影定影處理,把感光的氯化銀還原成黑色的銀顆粒,即可根據這些銀顆粒的部位和數量分析出標本中放射性示蹤物的分布,以進(jìn)行定位和定量分析。
實(shí)驗用品
器具:顯微鏡、恒溫培養箱、電冰箱、干燥箱、電吹風(fēng)、暗室
試劑:酒精、二甲苯、Giemsa 染色液、乳膠、顯影液、定影液、3H-TdR
材料:小白鼠
實(shí)驗內容及方法
1. 同位素標記 將3H-TdR 注射到小白鼠的腹腔中
2. 制片 標記3-4 小時(shí)后,處死小白鼠,將取出組織并固定4 小時(shí)左右,然 后進(jìn)行切片
3. 涂乳膠 在暗室中把乳膠涂在載玻片上,直立于盒內,在暗處涼干
4. 曝光 將涼干的切片放入暗盒,盒內放入少量干燥劑,用黑紙封嚴,放在4 攝氏度冰箱中曝光10-14 天
5. 顯影、定影
6. 染色 用Giemsa 染色液染色10-15 分鐘。自來(lái)水沖洗、涼干
7. 觀(guān)察 在顯微鏡下觀(guān)察同位素在細胞中的分布