蘇木精-伊紅染色方法，簡(jiǎn)稱(chēng)HE染色方法，是生物學(xué)和醫學(xué)的細胞與組織學(xué)最廣泛應用的染色方法。在病理學(xué)實(shí)驗室中稱(chēng)為常規染色方法。病理細胞和組織學(xué)的診斷，教學(xué)和研究都是用HE染色方法觀(guān)察正常和病變組織的形態(tài)結構。因此病理學(xué)工作者必需學(xué)習和掌握這種染色方法。
  

（一）HE染色的基本原理

      1．細胞核染色的原理
 
      細胞核內的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸（DNA），DNA的雙螺旋結構中，兩條鏈上的磷酸基向外，帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精鹼性染料以離子鍵或氫鍵結合而染色。蘇木精在堿性染料中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。
 
      2．細胞漿染色的原理
 
      細胞漿內主要成分是蛋白質(zhì)，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽(yáng)離子），就可被帶負電荷（陰離子）的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中離解成帶負電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷（陽(yáng)離子）結合而使細胞漿染色，細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色，與藍色的細胞核形成鮮明的對比。伊紅是細胞漿的良好染料。
 
      隨著(zhù)科學(xué)技術(shù)快速發(fā)展和電子計算機的廣泛應用，染色自動(dòng)儀器的出現，許多實(shí)驗室已用全自動(dòng)染色機代替人工染色。
    
（二）人工操作蘇木精伊紅染色方法
  
      1．染色步驟
 
      二甲苯I脫蠟10min.
 
      二甲苯II脫蠟5min。
  
      無(wú)水乙醇洗去二甲苯1min×2次。
  
      95%酒精1min。
 
       90%酒精1min。
 

      85%酒精1min。
  
      自來(lái)水洗2min。
 
      蘇木精染色1min至5min。
  
      自來(lái)水洗1min。
 
      1%鹽酸酒精分化20s。
 
      自來(lái)水洗1min。
 
      稀氨水（1%）反藍30s。自來(lái)水洗或蒸餾水洗1min。
 
      伊紅染色20s至5min。
 
      自來(lái)水洗30s。
  
      85%酒精脫水20s。
 
      90%酒精30s。
      
       2．染色結果
 
      細胞核呈藍色，細胞漿、肌肉、結締組織、紅細胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍色或紫藍色。
 
（三）染色液的配制
 
      1．蘇木精（素）
 
      蘇木精是一種純天然染料，是從蘇木素樹(shù)提煉出來(lái)的，蘇木樹(shù)主產(chǎn)墨西哥的坎偑切，蘇木精的染色性能差，經(jīng)過(guò)一百多年精心加工配制，現用的蘇木精配方，染色性能好，保持時(shí)間長(cháng)，是世界上唯一的常規細胞核染料，
 
      2．蘇木精的配制
 
      蘇木精的配方很多，可根據不同需要選用，Harris配方最常用。
 
     （1）Harris蘇木精的配制
 
       蘇木精1g
 
      硫酸鋁鉀15g
 
      無(wú)水乙醇10ml
 
      蒸餾水200ml
 
     先用蒸餾水加熱溶解硫酸鋁鉀，用無(wú)水乙醇溶解蘇木精再倒入已溶解的硫酸鋁鉀蒸餾水中，煮沸1min后，稍冷卻，慢慢加入紅色氧化汞0.5g，繼續加熱至染液變?yōu)樽霞t色，用紗布蓋瓶口，用前濾紙過(guò)濾后每100ml加冰醋酸5ml。
 
    （2）Mayer蘇木精改良配法
 
      A液
  
      蘇木精2g
 
      無(wú)水乙醇40ml
 
      B液

 
      硫酸鋁鉀100g
 
      蒸餾水600ml
 
      稍加熱使硫酸鋁鉀在水中溶解，將蘇木精溶于酒精中，再將A液與B液混合煮沸2min。用蒸餾水補足600ml，加入400mg碘酸鈉充分混勻，蘇木精染液呈紫紅色。
 
     （3）Gill改良蘇木精染液的配制
 
       蘇木精2g
 
       無(wú)水乙醇250ml
 
       硫酸鋁鉀17g
 
       蒸餾水750ml
 
       碘酸鈉0.2g
 
      冰醋酸20ml
 
      先將蘇木精溶于無(wú)水乙醇，再將硫酸鋁鉀溶于蒸餾水中。兩液溶解后將其混合，加入碘酸鈉待蘇木精氧化成紫紅色，再加入冰醋酸。
 
      3．伊紅溶液的配制
 
      （1）水溶性伊紅
 
       伊紅Y0.5－1g
 
       蒸餾水100ml
 
       先將水溶性伊紅加入蒸餾水中，用玻璃棒將伊紅攪起泡沫后過(guò)濾，每100ml加冰醋酸1滴。
 

      （2）乙醇性伊紅液的配制
 
      伊紅Y 0.5～1g

      90%酒精100ml
 
      先將伊紅溶于酒精中，用玻璃棒研碎溶解后，每100ml加冰醋酸1滴。用乙醇性伊紅液染細胞漿后不可經(jīng)水洗直接用85%酒精脫水。
  
      4．鹽酸酒精分化液的配制
 
      濃鹽酸0.5～1ml
 
      75%酒精99ml
 
       此液用一段時(shí)間后需要延長(cháng)或更換液體，新液分化時(shí)間要短。

       （本文轉載丁香通）