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病理學(xué)的幾個(gè)研究方法

     病理學(xué)的研究方法多種多樣,研究材料主要來(lái)自患病人體(人體病理材料)和實(shí)驗動(dòng)物以及其他實(shí)驗材料如組織培養、細胞培養等(實(shí)驗病理材料)。

 

(一)尸體剖檢


     對死亡者的遺體進(jìn)行病理剖檢(尸檢)是病理學(xué)的基本研究方法之一。尸體剖檢(autopsy)不僅可以直接觀(guān)察疾病的病理改變,從而明確對疾病的診斷,查明死亡原因,幫助臨床探討、驗證診斷和治療是否正確、恰當,以總結經(jīng)驗,提高臨床工作的質(zhì)量,而且還能及時(shí)發(fā)現和確診某些傳染病、地方病、流行病、為防治措施提供依據,同時(shí)還可通過(guò)大量尸檢積累常見(jiàn)病、多發(fā)病、以及其他疾病的人體病理材料,為研究這些疾病的病理和防治措施,為發(fā)展病理學(xué)作貢獻。顯然,尸檢是研究疾病的極其重要的方法和手段,人體病理材料則是研究疾病的最為寶貴的材料。

 

     一個(gè)國家尸檢率的高低往往可以反映其文明進(jìn)步的程度,世界上不少文明先進(jìn)國家的尸檢率達到90%以上,有的國家在法律中對尸檢作了明文規定。中國的尸檢率還很低,十分不利于中國病理學(xué)和醫學(xué)科學(xué)的發(fā)展,亟待提高。

 

(二)活體組織檢查

 

     用局部切除、鉗取、穿刺針吸以及搔刮、摘除等手術(shù)方法,由患者活體采取病變組織進(jìn)行病理檢查,以確定診斷,稱(chēng)為活體組織檢查(biopsy),簡(jiǎn)稱(chēng)活檢。這是被廣泛采用的檢查診斷方法。這種方法的優(yōu)點(diǎn)在于組織新鮮,能基本保持病變的真像,有利于進(jìn)行組織學(xué)、組織化學(xué)、細胞化學(xué)及超微結構和組織培養等研究。對臨床工作而言,這種檢查方法有助于及時(shí)準確地對疾病作出診斷和進(jìn)行療效判斷。特別是對于諸如性質(zhì)不明的腫瘤等疾患,準確而及時(shí)的診斷,對治療和預后都具有十分重要的意義。

 

(三)動(dòng)物實(shí)驗


     運用動(dòng)物實(shí)驗的方法,可以在適宜動(dòng)物身上復制某些人類(lèi)疾病的模型,以便研究者可以根據需要,對之進(jìn)行任何方式的觀(guān)察研究,例如可以分階段地進(jìn)行連續取材檢查,以了解該疾病或某一病理過(guò)程的發(fā)生發(fā)展經(jīng)過(guò)等。此外,還可利用動(dòng)物實(shí)驗研究某些疾病的病因、發(fā)病機制以及藥物或其他因素對疾病的療效和影響等。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是可以彌補人體觀(guān)察之受限和不足,但動(dòng)物與人體之間畢竟存在種種差異,不能將動(dòng)物實(shí)驗的結果直接套用于人體,這是必須注意的。

 

(四)組織培養與細胞培養


     將某種組織或單細胞用適宜的培養基在體外加以培養,以觀(guān)察細胞、組織病變的發(fā)生發(fā)展、如腫瘤的生長(cháng)、細胞的癌變、病毒的復制、染色體的變異等等。此外,也可以對其施加諸如射線(xiàn)、藥物等外來(lái)因子,以觀(guān)察其對細胞、組織的影響等。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是,可以較方便地在體外觀(guān)察研究各種疾病或病變過(guò)程,研究加以影響的方法,而且周期短、見(jiàn)效快,可以節省研究時(shí)間,是很好的研究方法之一。但缺點(diǎn)是孤立的體外環(huán)境畢竟與各部分間互相聯(lián)系、互相影響的體內的整體環(huán)境不同,故不能將研究結果與體內過(guò)程等同看待。

 

(五)病理學(xué)的觀(guān)察方法


     隨著(zhù)學(xué)科的發(fā)展,病理學(xué)的研究手段已遠遠超越了傳統的經(jīng)典的形態(tài)觀(guān)察,而采用了許多新方法、新技術(shù),從而使研究工作得到了進(jìn)一步的深化,但形態(tài)學(xué)方法(包括改進(jìn)了的形態(tài)學(xué)方法)仍不失為基本的研究方法。茲將常用的方法簡(jiǎn)述如下:

 

大體觀(guān)察

 

     主要運用肉眼或輔之以放大鏡、量尺、各種衡器等輔助工具,對檢材及其病變性狀(大小、形態(tài)、色澤、重量、表面及切面狀態(tài)、病灶特征及堅度等)進(jìn)行細致的觀(guān)察和檢測。這種方法簡(jiǎn)便易行,有經(jīng)驗的病理及臨床工作者往往能借大體觀(guān)察而確定或大致確定診斷或病變性質(zhì)(如腫瘤的良惡性等)。

 

組織學(xué)觀(guān)察

 

     將病變組織制成厚約數微米的切片,經(jīng)不同方法染色后用顯微鏡觀(guān)察其細微病變,從而千百倍地提高了肉眼觀(guān)察的分辨能力,加深了對疾病和病變的認識,是最常用的觀(guān)察、研究疾病的手段之一。同時(shí),由于各種疾病和病變往往本身具有一定程度的組織形態(tài)特征,故??山柚M織學(xué)觀(guān)察來(lái)診斷疾病,如上述的活檢。

 

細胞學(xué)觀(guān)察 

 

     運用采集器采集病變部位脫落的細胞,或用空針穿刺吸取病變部位的組織、細胞,或由體腔積液中分離所含病變細胞,制成細胞學(xué)涂片,作顯微鏡檢查,了解其病變特征。此法常用于某些腫瘤(如肺癌、子宮頸癌、乳腺癌等)和其他疾病的早期診斷。但限于取材的局限性和準確性,有時(shí)使診斷難免受到一定的限制。既提高了穿刺的安全性,也提高了診斷的準確性。

超微結構觀(guān)察

 

     運用透射及掃描電子顯微鏡對組織、細胞及一些病原因子的內部和表面超微結構進(jìn)行更細微的觀(guān)察(電子顯微鏡較光學(xué)顯微鏡的分辨能力高千倍以上),即從亞細胞(細胞器)或大分子水平上認識和了解細胞的病變。這是迄今最細致的形態(tài)學(xué)觀(guān)察方法。在超微結構水平上,還常能將形態(tài)結構的改變與機能代謝的變化聯(lián)系起來(lái),大大有利于加深對疾病和病變的認識。

組織化學(xué)和細胞化學(xué)觀(guān)察

 

     通過(guò)運用具有某種特異性的、能反映組織和細胞成分化學(xué)特性的組織化學(xué)和細胞化學(xué)方法,可以了解組織、細胞內各種蛋白質(zhì)、酶類(lèi)、核酸、糖原等等化學(xué)成分的狀況,從而加深對形態(tài)結構改變的認識。這種方法不僅可以揭示普通形態(tài)學(xué)方法所不能觀(guān)察到的組織、細胞的化學(xué)成分的變化,而且往往在尚未出現形態(tài)結構改變之前,就能查出其化學(xué)成分的變化。此外,隨著(zhù)免疫學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,還可運用免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)的方法,了解組織、細胞的免疫學(xué)性狀,對于病理學(xué)研究和診斷都有很大幫助。

 

     除上述常用方法外,近數十年來(lái)陸續建立的還有放射自顯影技術(shù)、顯微分光技術(shù)、形態(tài)測量(圖像分析)技術(shù)、分析電鏡技術(shù)、流式細胞儀(FCM)技術(shù)、多聚酶鏈反應(PCR)技術(shù)以及分子原位雜交技術(shù)等一系列分子生物學(xué)技術(shù),從而使常規的病理形態(tài)學(xué)觀(guān)察,發(fā)展到將形態(tài)結構改變與組織、細胞的的化學(xué)變化結合志來(lái)進(jìn)行研究,而且將歷來(lái)的定性的研究發(fā)展到對病理改變進(jìn)行形態(tài)的和化學(xué)成分的定量研究,從而獲得了大量的更多更新的新信息,大大加深了疾病研究的深度。這是以往的研究所難以實(shí)現的。

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