每個(gè)細胞的基因表達都有其特異性,單細胞,如干細胞、神經(jīng)元細胞、發(fā)育的組織、激光捕獲切片等樣本中研究基因表達具有一定的困難性。Signosis開(kāi)發(fā)了一種高敏感性的單細胞RT-PCR檢測試劑,無(wú)需RNA制備,直接用細胞裂解產(chǎn)物進(jìn)行分析。因此,少量細胞即可用于RT-PCR分析。細胞裂解、cDNA合成以及PCR擴增所需的組分均包含在該試劑盒中。
A.產(chǎn)品優(yōu)勢
一站式——試劑盒包含從細胞裂解、反轉錄到PCR實(shí)驗所需的所有試劑;
無(wú)需RNA制備——細胞裂解產(chǎn)物可直接用于反轉錄;
功能強大——該試劑可獲得全長(cháng)的cDNA;
實(shí)時(shí)監控——整個(gè)分析過(guò)程可以實(shí)時(shí)監控。
B.技術(shù)原理
無(wú)需RNA制備,細胞裂解液裂解細胞后直接進(jìn)行反轉錄,及隨后的PCR分析。
C.原理示意圖
D.結果展示
檢測細胞裂解產(chǎn)物中有限的目標序列。逐漸增加細胞裂解的HeLa細胞數量。所有的樣本用試劑盒中的RT-PCR試劑進(jìn)行反轉錄。用ABI7700檢測系統分析所有樣本中β-actin、GAPDH和B2M三個(gè)基因的Real-time PCR結果,分別做三次重復。