乙酰膽堿對鯽魚(yú)離體腸平滑肌的作用

一、前言  

      在生理學(xué)實(shí)驗中，通過(guò)學(xué)生自主設計實(shí)驗項目，收集資料完成實(shí)驗并以論 文格式完成實(shí)驗報告，有利于學(xué)生及時(shí)掌握生理學(xué)實(shí)驗的基本內容，旨在培養和提高學(xué)生觀(guān)察、分析、綜合、獨立思考和解決問(wèn)題的思維能力。促胃腸動(dòng)力藥 包括很多種類(lèi), 這類(lèi)藥物有著(zhù)不同受體類(lèi)型和化學(xué)結構以及作用機制, 對從食管到結腸的胃腸道的不同部位有著(zhù)不同程度的促動(dòng)力作用.這類(lèi)藥物對胃腸道作用機制的研究包括: 膽堿能機制、腎上腺能機制、抗多巴胺和抗膽堿脂酶機制、神 經(jīng)體液機制等。本實(shí)驗重在探索通過(guò)離體器官實(shí)驗，建立方法研究藥物對M膽堿受體的激動(dòng)作用和競爭性拮抗作用。M膽堿受體激活劑乙酰膽堿能劑量依賴(lài)性地激動(dòng)腸管平滑肌上的M膽堿膽堿受體，產(chǎn)生平滑肌收縮效應，M膽堿受體抑制 劑阿托品可競爭性拮抗乙酰膽堿對M膽堿受體的激動(dòng)作用。

一、課題名稱(chēng)：

      靜脈注射和口服等量生理鹽水對小白鼠尿量的影響。實(shí)驗目的：通過(guò)對小白鼠注射和口服等量生理鹽水，了解尿液生 成過(guò)程，進(jìn)一步熟悉掌握腎小管的功能?；驹恚? 生理鹽水對尿液的影響：加大了血液中水的含量,沖淡了血液,增加人體的排尿量.腎臟為了維持體內水的平衡,通過(guò)生成尿液來(lái)實(shí)現.尿的生成來(lái)源于血漿,通過(guò)腎小球的濾過(guò),腎小管的吸收,腎小管的徘匯和分泌這三個(gè)過(guò)程來(lái)完成.在這三個(gè)過(guò)程中,除了生成尿液外,腎臟同時(shí)根據體內水分的多少對尿量進(jìn)行調節,而保持水的平衡,維持人的正常生活. 

二、研究?jì)热?nbsp;

      1、通過(guò)向離體小腸滴加不同濃度乙酰膽堿和阿托品觀(guān)察小腸平滑肌的收縮曲線(xiàn)變化  

      2、通過(guò)生物信號采集系統對鯽魚(yú)收縮曲線(xiàn)進(jìn)行記錄。研究對象  鯽魚(yú)，鯉形目、鯉科、鯽屬，是一種主要以植物為食的雜食性魚(yú)，喜群集而行擇食而居。鯽魚(yú)分布廣泛，全國各地水域常年均有生產(chǎn)，以2～4月份和8～12月份的鯽魚(yú)最肥美，為我國重要食用魚(yú)類(lèi)之一。   

四、實(shí)驗藥品及設備  

1、試劑和藥品：

      乙酰膽堿（mol/L）：1:32000、 1:16000、1:8000、1:4000、1:2000、1：1000  阿托品（mol/L）：3*10-7  Jaeger：氯化鈉6.0g、氯化鉀0.12g、氯化鈣0.14g、碳酸氫鈉0.2g、磷酸二氫鈉0.01、葡萄糖2.0g、蒸餾水加至1000ml、pH7.2  2. 裝置和器材：恒溫平滑肌浴槽、計算機生物信號采集系統、萬(wàn)能支架、加液器、紗布、張力換能器、魚(yú)類(lèi)手術(shù)器械一套。

五、實(shí)驗方法與步驟 

1．離體腸肌的制備 

       猛擊鯽魚(yú)頭部至昏，立即剖開(kāi)腹腔，自幽門(mén)下5cm剪取空腸和回腸上段，迅速置于Jaeger液中。小心剪去腸系膜，用吸管吸取Jaeger液緩慢沖洗腸內容物；將空腸段分割成2 cm的小段備用，用棉線(xiàn)結扎腸斷兩端,作為固定腸肌之用。 

2．實(shí)驗裝置  

      將制成的標本一端一端結扎線(xiàn)連于浴槽內的標本固定鉤上，另一端連接于肌力換能器的應變片上并與生物信號采集系統的刺激器輸出相連，浴池內放20ml Jaeger液。適當調節換能器的高度，使其與標本間的松緊度合適。將腸段完全浸浴在調好溫度的浴槽中，并調整好Jaeger充氣量(小氣泡接連不斷)。

實(shí)驗目的：通過(guò)對小白鼠注射和口服等量生理鹽水，了解尿液生 成過(guò)程，進(jìn)一步熟悉掌握腎小管的功能。

六、方法與步驟：     

      1、小白鼠抓取、稱(chēng)重、麻醉：抓取3只體型相近、健康指數大致 一致的小白鼠稱(chēng)重，然后用25%氨基甲酸乙酯溶液（按1g/kg或4ml/kg用量），從耳緣靜脈注入，小白鼠麻醉成功后，使其仰臥并用繩固定在兔臺上備用，并標號、記錄數據； 

      2、分別對上述上三只小白鼠進(jìn)行注射、口服30ml等量生理鹽水和空白對照處理；

      3、在胱底部找到并分離兩側輸尿管，在輸尿管靠近膀胱處用細線(xiàn)結扎，另穿一細線(xiàn)打松結備用，略等片刻，待輸尿管充盈后，提起結扎細線(xiàn)，在管壁上用眼科剪剪一小斜口，從斜口向腎臟方向插入口徑適當的預先充滿(mǎn)生理鹽水的輸尿管插管，結扎固定，用試管收集尿液。  

      4、三小時(shí)后，每隔半小時(shí)，觀(guān)察小白鼠尿量變化（滴/分），做好記錄，并繪制成曲線(xiàn)圖觀(guān)察。

      （本文轉載丁香園）