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動(dòng)物腦內給藥解決方案

 

一、研究背景

 

      在腦科學(xué)基礎研究領(lǐng)域中,腦內給藥已經(jīng)成為大多數動(dòng)物實(shí)驗的重要環(huán)節,比如注射病毒、細胞、蛋白分子、藥物、標記染料探針等,根據實(shí)驗設計,常見(jiàn)有兩種給藥方式:?jiǎn)未巫⑸浣o藥和多次反復給藥(慢性給藥),前者通常采用微量注射器(如下圖,左),后者采用套管(如下圖,右)來(lái)實(shí)現。無(wú)論哪一種方式,均具有操作簡(jiǎn)單、動(dòng)物微創(chuàng )(或無(wú)創(chuàng ))、注射精準等優(yōu)點(diǎn)。

二、套管微量給藥系統

      本文主要介紹多次反復給藥方式套管。

 


      功能用途:用于小鼠、大鼠、猴等實(shí)驗動(dòng)物目標腦區的反復多次給藥,也可以結合配套光纖使用(光遺傳),在給藥的同時(shí)或者給藥后繼續對目標腦區進(jìn)行光刺激。

      應用范圍:人類(lèi)神經(jīng)性疾病動(dòng)物模型、高級腦功能、情感、認知等相關(guān)研究。

三、套管系統配套(單管)



 



       套管系統組配套(雙管)


 



四、動(dòng)物實(shí)驗(材料準備)


 



      1. 儀器設備與配件:


      異氟烷氣體麻醉系統(包括定位儀專(zhuān)用麻醉面罩和氣體回收系統)、腦立體定位儀、顯微鏡、冷光源、保溫裝置(電子或水浴保溫)、顱骨水平校準器、顱鉆(包括鉆頭)、顱鉆夾持器、套管、套管夾持器、PE
管、小螺釘、微量注射泵、微量注射器、手術(shù)器械包、大小鼠剃毛器、凝血器、手術(shù)墊、快速滅菌器2.
試劑

      碘伏、酒精、酒精棉球、干棉球、生理鹽水、牙科水泥(牙托水和牙托粉)、抗生素、異氟烷、【注射藥物】

五、實(shí)驗操作步驟(說(shuō)明)

 



      第 1 步:根據腦圖譜或文獻確定目標腦區的三維坐標:AP 值(Y 軸)、ML 值(X 軸)和 DV 值(Y 軸);

 

      第 2 步:將動(dòng)物麻醉,頭部固定到腦立體定位儀上,定位好目標腦區的 X/Y 水平坐標,顱鉆或牙科鉆鉆孔(同時(shí)在孔位附近鉆 2-3
個(gè)小孔,用于固定螺絲),然后用針輕微刺破硬腦膜;

 

      第 3 步:將螺絲固定到孔內,然后將準備好的導管緩慢植入顱內,再用牙科水泥將螺絲和導管固定起來(lái);

 

      第 4 步:等待牙科水泥凝固后(約 15 分鐘左右),緩慢插入導管帽,鎖緊;根據實(shí)際情況判斷是否需要縫合皮膚;

 

      第 5 步:動(dòng)物恢復期,約 2-3 天即可恢復。在此期間,注意動(dòng)物感染,及時(shí)預防;

 

      第 6 步:將注射內管、PE 管、鎖緊螺帽、注射器提前組裝好,接著(zhù)取出導管帽,將注射內管緩慢插入導管,鎖緊;

 

      第 7 步:設置好注射量、注射速度,開(kāi)始注射。注射完畢后,靜止約 10 分鐘,待藥物被充分吸收,然后緩慢拔出注射內管,繼續插入導管帽,鎖緊。

 

六、注意事項

 

      1. 除金屬導管帽外,非金屬導管帽、導管、注射內管、導管帽芯、鎖緊螺帽和 PE 管均可以采用高壓蒸汽、紫外、環(huán)氧乙烷等方式進(jìn)行消毒滅菌;

 

      2. 使用 PE 管前,可以用大頭針將 PE 管的一端接頭撐大一點(diǎn)或者用酒精泡一小會(huì ),便于插入注射內管。插入注射內管時(shí),務(wù)必注意的是,PE 管必須套在白色層外層(非金屬管外層),否則易脫落、松動(dòng),導致漏液,如下圖紅色箭頭所示;

 

      3. 因 PE 管、注射內管內部存在死體積,因此在將注射內管、PE 管、鎖緊螺帽、注射器組裝好以后,插入導管前,應將注射液(比如藥物)將 PE 管和注射內管充滿(mǎn),保證注射的準確。操作方法:向前推注射器,直至注射內管前端有液體冒出。  

 

    (本文轉載丁香通) 
 

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