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羅紅霉素的犬體藥代動(dòng)力學(xué)及相對生物利用度研究

   

      藥物-機體相互作用一方面是藥物對機體的作用,產(chǎn)生藥效、毒性或副作用,表現為藥物的藥理作用或毒理作用,決定于特定的化學(xué)結構,具有較強的結構特異性。另一方面是機體對藥物的作用:吸收、分布,生物轉化和排泄,表現為藥物的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。主要取決于藥物的溶解性、脂水分配系數、電荷等藥物分子整體的理化性質(zhì),結構特異性不強。 藥代動(dòng)力學(xué)是應用數學(xué)模型和計算公式闡明藥物的體內過(guò)程隨時(shí)間而改變的量變規律,從而揭示藥物在體內的位置(房室)、濃度與時(shí)間的關(guān)系。
 
實(shí)驗目的

      1.掌握微生物法測定羅紅霉素血藥濃度的基本原理與操作。
      2.熟悉相對生物利用度的測定。
      3.了解羅紅霉素的動(dòng)物藥代動(dòng)力學(xué)研究過(guò)程。
 
實(shí)驗材料
       1、 動(dòng)物
      健康犬12只,♂,體重12kg左右,由安徽醫科大學(xué)實(shí)驗動(dòng)物中心提供(皖醫實(shí)動(dòng)準第01號)。
  
       2 、藥品
      羅紅霉素片,商品名羅邁新,麗珠集團麗珠制藥廠(chǎng),規格150mg/片,批號020602。
      羅紅霉素片,商品名浦虹,上海醫藥工業(yè)研究院亞?wèn)|藥業(yè)公司浦東藥廠(chǎng),規格150mg/片,批號020601。
      羅紅霉素標準品,含量949.5(u/mg),批號020205M。
  
       3 、檢定菌
      藤黃微球菌標準菌株CMCC(B)28001,衛生部藥品生物制品檢驗所提供。
  
       4、 試劑
      磷酸鹽緩沖液(pH6.0),安徽醫科大學(xué)第一附屬醫院檢驗科臨床微生物室配制,過(guò)濾,115℃高壓30分鐘。
      培養基Ⅱ,安徽醫科大學(xué)第一附屬醫院檢驗科臨床微生物室配制,過(guò)濾,115℃高壓30分鐘。
      營(yíng)養瓊脂干粉,杭州天和微生物試劑廠(chǎng),按其說(shuō)明書(shū)配制,用于轉種藤黃微球菌標準菌株和細菌菌落計數。
 
實(shí)驗方法

      1、標準曲線(xiàn)制備


      將已高壓滅菌的培養基Ⅱ加熱溶解后傾入無(wú)菌培養皿,藤黃微球菌標準菌株菌液(104-105CFU/ml)均勻涂抹無(wú)菌培養皿,置35℃溫箱10-20分鐘。用直徑為3.5mm打孔器在培養皿打2孔,用于加入標準品及血漿樣品。精密稱(chēng)取羅紅霉素標準品50mg,用1ml無(wú)水乙醇溶解后,加入4mlPH6.0磷酸鹽緩沖液,制成儲備液(1000 mg·l-1)。取0.1ml儲備液加入9.9mlPH6.0磷酸鹽緩沖液,制成中間液體(100 mg·l-1),用犬血漿稀釋成10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625mg·l-1,取20ul加入上述孔中,置35℃溫箱16小時(shí),用游標卡尺測量抑菌環(huán)直徑(mm)。以抑菌環(huán)直徑D為橫坐標,濃度C(mg·l-1)的對數為縱坐標繪制標準曲線(xiàn),回歸方程為:lgC=-1.219+0.083D,r =0.9958。

 

      2、 回收率試驗


      分別制備高、中、低3種濃度的羅紅霉素血漿樣品,按標準曲線(xiàn)制備項下方法操作,將抑菌環(huán)直徑代入標準曲線(xiàn)計算羅紅霉素濃度,以測得值與加入值之比計算回收率。
 

      3、 精密度試驗


      分別制備高、中、低3種濃度的羅紅霉素血漿樣品,按標準曲線(xiàn)制備項下方法操作,1日內連續測定5次,計算日內相對標準差;將制備的高、中、低3種濃度的羅紅霉素血漿樣品連續測定5日,計算日間相對標準差。
 

      4、 藥動(dòng)學(xué)試驗方案


      12只犬隨機分為2組,每組6只,用藥前禁食12小時(shí),用藥后禁食4小時(shí),禁水2小時(shí)。供試藥物組與對照藥物組分別灌胃浦虹、羅邁新2片(150mg×2),分別于0h(給藥前)及給藥后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12、18、24、36、48、60、72h。采血3ml,血標本收集于一次性肝素抗凝的負壓真空采血管(成都瑞琪C.D.RICH產(chǎn)品,批號020313)內,離心(3000r?min-1,10min)分離出血漿,血漿樣品保存于-20℃待測。血藥濃度測定方法同標準曲線(xiàn)。
 

      5、 數據處理


      血藥濃度-時(shí)間數據采用3p87藥代動(dòng)力學(xué)軟件計算。峰濃度(Cmax)和達峰時(shí)間(Tmax)為實(shí)測值,對浦虹和羅邁新的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數采用配對t檢驗進(jìn)行統計分析,以羅邁新藥時(shí)曲線(xiàn)下面積為標準,計算浦虹的相對生物利

 

     (本文轉載丁香園

 

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