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實(shí)質(zhì)等同性(轉錄組學(xué))


1. 引言


  在 21 世紀,如何養活不斷膨脹的世界入口是一個(gè)主要挑戰 [ 1 ] 。毫無(wú)疑問(wèn),轉基因技術(shù)將對提髙作物產(chǎn)量和質(zhì)量做出重要貢獻。然而,由于公眾在某種程度上對轉基因技術(shù)安全存在擔憂(yōu),因此,在西歐,轉基因作物的接受程度很低。監管部門(mén)允許轉基因作物商業(yè)化生產(chǎn)應用之前,也需要其詳細的研究資料,包括證明它們與常規育種產(chǎn)生的作物是實(shí)質(zhì)等同性的 [ 2 ] 。

  雖然 “實(shí)質(zhì)等同性”很難精確定義,但通常被認為是指在同樣生長(cháng)條件下轉基因系的成分,應該與常規育種品系處于同一范圍之內。使用定制的 cDNA 芯片 [3~5 ] ,我們鑒定了轉基因小麥和常規小麥之間的轉錄組實(shí)質(zhì)等同性,這兩種小麥由胚乳特異性啟動(dòng)子驅動(dòng),表達相同的高分子質(zhì)量谷蛋白亞基基因。通過(guò)對這組數據的分析,首先鑒別出顯著(zhù)差異表達的基因( P <0.05 ) ,然后從中挑取變化倍數大于臨界值(1.5 ) 的基因。轉基因系還表達了 bar 和 uidA 標記基因,并含有基因和質(zhì)粒骨架序列 [ 6~8 ] 。因此,我們也比較了導入整個(gè)質(zhì)粒,或者切除后僅包含高分子質(zhì)量谷蛋白亞基基因 DNA 片段,以及僅含選擇標記基因的轉基因系 [ 5 ] ( 見(jiàn)注1)。結果表明所研究的轉基因的表達,對麥粒發(fā)育期整個(gè)基因組的表達在統計上沒(méi)有顯著(zhù)的影響,特別是在常規育種的姐妹株系(sibling   lines ) 之間產(chǎn)生更大差異時(shí),如顯著(zhù)表達差異基因數和倍數不同時(shí),也無(wú)轉基因表達顯著(zhù)影響的證據[ 5 ]。

  這里敘述的方法都是為利用 cDNA 芯片系統而研發(fā)的。這類(lèi)芯片仍然被廣泛地使用,特別適用于小規模分析少量候選基因,通常稱(chēng) “精品陣列”。然而,多數大規?;虮磉_研究現在仍使用 Affymetrix 寡聚核苷酸芯片,如小麥基因芯片覆蓋的基因更廣,重復性和穩定性更好。這里表述的許多方法,同樣適用于寡聚核苷酸芯片系統,如 RNA 樣品制備,也包含了特異的 GeneChip 表達分析。

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