我們做的是大腸桿菌的基因工程菌。前段時(shí)間連著(zhù)三批都感染了噬菌體，每天一批，我們做的是60T發(fā)酵罐。

     噬菌體爆發(fā)跡象：

     1、PH一直回升，會(huì )比較高（我們正常是7.00，回升到7.8）。

     2、DO也很快回升，會(huì )上升到130%多。

     3、發(fā)酵液變稀，OD值很快下降。

     4、鏡檢看不到任何菌體。

     5、爆發(fā)的時(shí)間一次比一次提前，都是發(fā)酵前期。

     噬菌體爆發(fā)的速度很快，也就那么30分鐘左右，當時(shí)我們剛剛移種也就那么發(fā)酵周期3~5h，太可怕了；你 想正常的發(fā)酵罐也就那么30分鐘，一下子全部都沒(méi)有了；

     爆發(fā)之后全廠(chǎng)進(jìn)行漂白粉噴灑，新潔爾滅噴灑，甲醛熏蒸；連續幾天每天都是做衛生；

     個(gè)人觀(guān)點(diǎn)： 噬菌體爆發(fā)原因分析

     1、當時(shí)車(chē)間更換了新的領(lǐng)導，沒(méi)有對于環(huán)境衛生給予重視；

     2、當時(shí)車(chē)間也進(jìn)行改造，衛生只是稍微做，連續有4個(gè)月；

     3、車(chē)間改造，把消毒的整氣，一些小排氣都排放在車(chē)間內部，而且是直接排放到空間，導致整個(gè)車(chē)間的濕度比較大；

     4、當時(shí)車(chē)間設計時(shí)不合理，導致大罐一樓蛇管循環(huán)水排放直接到地面，導致地面長(cháng)期有大量積水，有時(shí)地板都有長(cháng)霉；

     5、化驗室人員沒(méi)有培訓到位，取樣直接排放，沒(méi)有經(jīng)過(guò)廢液桶就直接排放到取樣槽內；還有化驗人員對于測定OD值的稀釋液直接到如下水道；

     6、值班室人員也同樣沒(méi)有培訓到位，對于泡沫的處理有時(shí)導致逃液；

     7、剛開(kāi)始感染噬菌體的時(shí)候，沒(méi)有引起足夠的重視，沒(méi)有采取相應的措施；

     個(gè)人認為對于噬菌體的防止 首先重要的是周遍的衛生環(huán)境，以及車(chē)間的人員管理，要嚴格按照GMP執行。 希望大家都來(lái)進(jìn)行討論針對噬菌體的處理方法。

     噬菌體爆發(fā)后應采取的措施：

     停產(chǎn)，用次氯酸鈉將房間整個(gè)清潔消毒，所有器具高溫滅菌或用次氯酸鈉浸泡。

     地面用量：有效氯濃度2500ppm，大于30min； 器具：有效氯濃度500ppm，20min。搖床用甲醛加高錳酸鉀熏蒸，用前再用紫外照射半小時(shí)； 發(fā)酵罐高溫滅菌。

     如果空氣中噬菌體濃度也較高的話(huà)，可以用甲醛熏蒸，3g/平米；或用紫外照射，但要注意，因為這兩種方法都可能對儀器造成腐蝕。下水也要用次氯酸鈉處理?？諝庵惺删w的檢測：雙層平板法，下層是生產(chǎn)菌或敏感菌的培養基，上層是營(yíng)養肉湯軟瓊脂，雙層瓊脂板開(kāi)蓋放30min，30度培養過(guò)夜?？从袩o(wú)噬菌斑。

     如果還不行，只好停產(chǎn)?；蛘邠Q一個(gè)菌種，因為噬菌體有很好的特異性。而最根本的是要制定驗室安全規范，杜絕活菌的散布。