接合菌亞門(mén)的真菌叫接合菌，也是真菌中比較低等的一類(lèi)，這類(lèi)真菌的營(yíng)養體為無(wú)隔菌絲體，無(wú)性繁殖產(chǎn)生孢囊孢子，有性繁殖產(chǎn)生接合孢子，接合菌分兩個(gè)綱：接合菌綱(Zygomtcetes)和毛菌綱(Trichomycetes)。與農業(yè)病害關(guān)系較大的是接合菌綱中的毛霉目(Mucorales)真菌，重要的有兩個(gè)屬：根霉屬(Rhizopus)和毛霉屬(Mucor)。本實(shí)驗的目的是熟悉與植病關(guān)系密切的接合菌的形態(tài)及其所致病害的癥狀特點(diǎn)，同時(shí)觀(guān)察真菌的異宗配合現象。

二、內容、材料和方法

      毛霉目(Mucorales)真菌大多是腐生菌，引起植物花、果實(shí)、塊根和塊莖的腐爛。

1. 根霉屬(Rhizopus)

      菌絲發(fā)達，有分枝，分布在基物表面或其內，有匍匐絲和假根。孢囊梗2-3根叢生，在假根相反方向從菌絲上產(chǎn)生，一般不分枝，頂生孢子囊，產(chǎn)生大量孢囊孢子，有囊軸，鑼錘形，孢囊孢子單胞，表面有飾紋，接合孢子色深，表面有瘤狀突起。

      取甘薯軟腐病(R.nigricans)標本，觀(guān)察癥狀特點(diǎn)，注意受害甘薯表面是否有白色毛狀物生出?在白色毛狀物中是否有黑點(diǎn)?挑取培養皿中培養的根足霉(帶少許培養基)制片)，鏡檢小黑點(diǎn)是什么器官?注意匍匐枝和假根的形態(tài)，孢囊梗著(zhù)生的位置，能否見(jiàn)到囊軸?什么形狀?

2. 毛霉屬(Mucor)

      無(wú)匍匐絲與假根，孢囊梗單生，直立，其它形態(tài)同根霉，挑取培養皿中培養的毛霉制片(或取制備片020)，鏡檢孢囊梗，孢子囊和孢囊孢子，注意和根霉的區別。

3. 笄霉屬(Choanephora)

      形成的大小兩種類(lèi)型的孢子囊，條件不適時(shí)，產(chǎn)生大型孢子囊，大型孢子囊產(chǎn)生在頂端彎曲的孢囊梗上，其內產(chǎn)生多數孢囊孢子，孢子頂端有數根細毛。通常形成小型孢子囊，小型孢子囊聚生在孢子囊梗頂端膨大的頭狀體的小梗上，其中形成一個(gè)孢子，故也稱(chēng)這種小型孢子囊為分生孢子。該菌為害花和果實(shí)，引起花腐和果腐，取制備片024，鏡檢笄霉的孢囊
梗和孢子囊形態(tài)，注意觀(guān)察該屬與根霉、毛霉的區別。

4. 犁頭霉屬(Absidia)

      產(chǎn)生匍匐絲和假根，孢囊梗自假根間的弓形匍匐絲上長(cháng)出，配囊柄上長(cháng)出附屬絲包圍接合孢子。取制備片023鏡檢犁頭霉的假根，匍匐 絲及配囊柄上長(cháng)出附屬絲包圍接合孢子的形態(tài)，注意孢囊梗著(zhù)生的位置和根霉有何不同。

5. 毛霉目真菌異宗配合現象觀(guān)察

      毛霉目真菌多具異宗配合現象，即當兩個(gè)不同交配型的菌株(“+”菌株和“-”菌株)相遇時(shí)，則從各自菌絲上產(chǎn)生稱(chēng)作原配子囊的分枝，兩個(gè)原配子囊接觸后，各自產(chǎn)生一個(gè)隔膜，將原配子囊分成兩個(gè)細胞，頂端的細胞稱(chēng)作配子囊，基部的細胞稱(chēng)配囊柄，“+”和“-”兩個(gè)配子囊接觸點(diǎn)的細胞壁消解，融合成一個(gè)細胞，以后發(fā)育成黑色，厚壁的接合孢子。

      每組取三個(gè)滅菌培養皿，分別將熔化的馬鈴薯洋菜培養基10毫升，在無(wú)菌操作下倒入培養皿中，凝固后翻轉培養皿，用玻璃筆在皿底外面劃一直徑，第一皿直徑兩側底內接種“+”菌株，第二皿兩側都接種“-”菌株，第三皿，一側接種“+”菌株，另一側接種“-”菌株，接種后，在25℃溫箱中培養一周，觀(guān)察兩個(gè)菌落生長(cháng)的交界處，有無(wú)黑色粒點(diǎn)，即接合孢子的形成，挑取菌落少許制片鏡檢。觀(guān)察接合孢子的形態(tài)，注意接合孢子形成的過(guò)程，三個(gè)培養皿中哪個(gè)處理能產(chǎn)生接合孢子?為什么?