1、96孔細胞培養 板中培養細胞，去培養液。用0.01mol/L PBS洗滌1次(如為懸浮細胞則用離心洗滌)。

     2、去洗滌液后加入磷酸酶底物100μl/孔。

     3、37℃，孵育1～4h。

     4、加入0.1mol/L氫氧化鈉10μl/孔。

     5、在多孔酶標儀 上405nm處測光吸收度，將細胞培養板其中不含細胞，同樣處理過(guò)的一孔作為空白對照，所測的每孔光吸收度可間接反應每孔中的細胞數。如在同樣條件下作一細胞數的系列標準對照，以細胞數為X軸，光吸收度為Y軸，可作直線(xiàn)回歸，可推算出每孔中的細胞。