FACS用于研究細胞組分DNA，碘化丙啶（PI）嵌入核酸雙鏈中并可以發(fā)熒光。它不能進(jìn)入活細胞，但是可以進(jìn)入正在或者已經(jīng)死亡的細胞。因此PI可以用于免疫熒光染色來(lái)鑒定死細胞。DNA染色可以用于研究細胞周期。相對的DNA含量可以堅持G1，G2和S期細胞的比例。在DNA染色中凋亡的細胞有特有的顏色。

     一、材料和試劑

     1.  TritonX-100（SigmaCatalogNo.T9284）

     2.  碘化丙啶（SigmaCatalogNo.P-4170）

     3.  乙醇

     4.  RNaseA（SigmaCatalogNo.R4642）

     二、儀器

     1.  離心機

     2.  流式細胞儀器（FACS）

     三、步驟

     1.  胰蛋白酶處理和收集細胞，將細胞固定到0.5 ml 70%EtOH（預冷到-20°C過(guò)夜）。

     2.  存儲固定的細胞到冰上至少一個(gè)小時(shí)最多到幾天。

     3.  離心細胞2 min，4 000 rpm。

     4.  在含有0.25%TritonX-100的0.5 ml PBS溶液中重懸細胞，并且在冰上孵育15 min。

     5.  離心細胞2 min，4 000 rpm。

     6.  棄掉上清液，并在含有10 μg/ml RNaseA和20 μg/ml PI儲存液的0.5 ml PBS重懸細胞，轉移到FACS管子中在黑暗中室溫孵育30分鐘。

     7.  準備做FACS。