培養細胞常用固定劑有4％多聚甲醛磷酸緩沖液、丙酮、甲醇和95％乙醇。在固定之前需用37℃預熱的PBS輕洗細胞。

     1．4％多聚甲醛磷酸緩沖液  固定10―20分鐘，干燥。

     2．甲醇  10‰甲醇固定5―20分鐘，自然干燥。

     3．丙酮  4℃冷丙酮固定組織穿透性和脫水性強，抗原保存好，很少用于組織切片，常用于培養細胞和細胞涂片的固定，平時(shí)丙酮4℃低溫保存備用，臨用時(shí)，將載玻片插入冷丙酮內5～10分鐘，取出后自然于燥。

     4．乙醇  95％乙醇脫水性強，易引起組織收縮、變硬，影響切片質(zhì)量，因而固定時(shí)間不宜過(guò)長(cháng)(2小時(shí)內)。乙醇使蛋白變性程度輕，固定后蛋白 可再溶解，在染色中孵育時(shí)間長(cháng)的情況下，抗原可流失，并減弱反應強度。

     5．乙醚(或三氯甲烷)  與乙醇等量混合對組織穿透性極強，即使涂片上含較多的黏液，固定效果仍較好，是理想的細胞固定液。

     培養細胞固定之后晾干可使細胞牢固地黏附在載玻片上，故對于容易脫落的細胞應延長(cháng)晾干時(shí)間。晾干之后PBS漂洗3次，然后進(jìn)行組織化學(xué)或免疫組織化學(xué)染色。

     用于免疫組織化學(xué)的固定劑種類(lèi)很多，不同的抗原和標本均可首選醛類(lèi)固定液，如效果不佳，再試用其他固定液。選擇最佳固定液的標準：一是能最好地保持組織細胞的形態(tài)結構；二是最大限度地保存抗原免疫活性和被檢物不被丟失。一些含重金屬固定液可用于組織化學(xué)標本的固定，但在免疫組織化學(xué)染色中禁用。