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動(dòng)物組織培養準備技術(shù)之清洗與滅菌(1)

(一)使用過(guò)的玻璃器皿的清洗


      1.使用過(guò)的培養用品應立即浸入清水,避免干涸難洗。

      2.用洗滌劑清洗玻璃器皿,自來(lái)水清洗數遍。倒置自然干燥。

      3.浸入酸性洗液過(guò)夜。將玻璃器皿浸泡2-4h后便可沖洗;當洗液使用時(shí)間過(guò)長(cháng),顏色由黑紅色變成黑綠色甚至墨綠色時(shí),應適當延長(cháng)浸泡時(shí)間。當酸性洗液轉變成綠色時(shí),應重新配置洗液。浸泡時(shí)應使瓶?jì)鹊乃胁AП砻娑冀佑|到洗液,勿留氣泡或死角。沒(méi)有浸泡干凈的玻璃器皿,可能會(huì )影響細胞的生長(cháng)狀態(tài)或影響顯微攝像的效果。

      4.培養用品從酸性洗滌液中撈出后用自來(lái)水沖洗10-15次,去除殘余酸液,蒸餾水涮洗3次或浸泡過(guò)夜,倒置烘干。

      5.包裝:用牛皮紙或一般紙將培養器皿包好。培養瓶和培養用瓶只需包裹封住瓶口即可。

 

(二)膠塞的處理


      1.新膠塞應先用清水清洗之后再用0.2%NaOH煮沸10-20min。

      2.自來(lái)水清洗10次。

      3.1%HCl浸泡30min。

      4.自來(lái)水清洗10次,蒸餾水涮洗3次。晾干后包裝,高壓滅菌。(舊膠塞不必用酸堿處理,可直接用洗滌劑煮沸和清洗數次,過(guò)蒸餾水,晾干,包裝,高壓滅菌,烘干后即可使用。)

 

(三)常用洗液的配置


      1.按照表1中提供的數據,稱(chēng)取重鉻酸鉀,于適當體積大小的玻璃燒杯中,加入表格中提示的蒸餾水,攪拌。

常用洗液配方

成分


強酸洗液


次強酸洗液


重鉻酸鉀


63g


3125g


120g


6000g


濃硫酸


1000ml


50000ml


200ml


10000ml


蒸餾水


200ml


10000ml


1000ml


50000ml


 

      2.加熱表1中的液體,并用玻璃棒不斷攪拌,待沸騰時(shí)重鉻酸鉀即可充分溶解。

      3.戴防酸手套和眼鏡,并穿戴好耐酸衣褲和鞋子。小心地將已溶解上述液體倒入一干凈無(wú)水的陶瓷材料的洗滌酸缸或其他耐酸材料的酸缸中。

      4.小心地將硫酸沿酸缸內壁緩慢地加入以上溶液中,邊加邊不斷慢慢攪拌。(小心酸濺出)

      5.正常使用情況下,酸性洗液半年左右配置一次。


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