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動(dòng)物組織培養準備技術(shù)之清洗和滅菌(3)

【注意事項】


  (1)干熱滅菌時(shí),應在白天使用干烤箱,并不斷觀(guān)察,避免發(fā)生意外。當溫度超過(guò)100℃時(shí),不能再打于烤箱門(mén)。器皿烤完后,待溫度降至100℃之下才能開(kāi)烤箱門(mén)取出滅菌物品。金屬器械、橡膠、塑料制品和一些高溫后變性的物品,均不能使用干熱消毒方法。


  (2)高壓滅菌后器皿務(wù)必燒烤或晾干,以防包布或紙潮濕而發(fā)霉。此外,落在潮濕包裝紙表面的細菌仍有機會(huì )通過(guò)滲入的水進(jìn)入已滅菌的瓶?jì)取?/span>


  (3)牛血清、大部分培養基、胰酶和一些生物制劑是有機溶液,均不能使用溫熱滅菌法,否則其中的蛋白質(zhì)將發(fā)生變性。而一些加熱分解的物質(zhì),如TdR、秋水仙素、谷氨酰胺、異硫氰酸胍、MOPS等,也不能進(jìn)行濕熱滅菌。


  (4)濾過(guò)滅菌時(shí),濾器在使用前先裝好濾膜(有時(shí)可在上面加一層定性濾紙),包好,經(jīng)高壓后才能使用。濾過(guò)酶類(lèi)制劑時(shí),應待過(guò)濾器降至室溫時(shí),才能進(jìn)行。使用濾過(guò)除菌時(shí),過(guò)濾泵調節的壓力不宜過(guò)大。壓力太大時(shí),微孔濾膜有可能破裂,或者使某些微生物在較大壓力下產(chǎn)生變形而通過(guò)濾膜。過(guò)濾器中的濾膜放置的位置一定要準確,防止邊緣留有縫隙,使過(guò)濾液直接通過(guò)。另外濾器包裝時(shí),螺釘不要擰得太緊,以免高壓蒸汽不能進(jìn)入,待高壓滅菌之后再擰緊使用。


  (5)使用化學(xué)消毒法時(shí),應用衛生級配制75%乙醇。而不能用化學(xué)純、分析純和優(yōu)級乙醇。來(lái)蘇兒水不能用于皮膚消毒,因為它對皮膚有刺激性??諝庀緯r(shí),所有的物品要事先準備齊全,并使用消毒者有較方便的迅速退出的路徑。因為一旦甲醛或乳酸被加熱后,放出的蒸汽對人的角膜和呼吸道上皮有嚴重的刺激和傷害作用。


  (6)與RNA操作有關(guān)的器皿消毒時(shí)間應更長(cháng),這不僅僅是為了滅菌,更為了來(lái)活RNA酶,防止在隨后的操作中RNA被殘留的RNA酶降解。如普通玻璃器皿干熱滅菌條件是160℃2h,而提取RNA的玻璃用品需180℃,至少4h。


  (7)使用乙醇消毒時(shí)注意應用75%乙醇,無(wú)水乙醇或95%乙醇不能達到消毒效果。


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