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在進(jìn)口優(yōu)質(zhì)血清缺乏情況下如何選擇細胞培養

    胎牛血清是細胞培養常用的添加物,目前享有盛譽(yù)的Life等國際品牌的最好胎牛血清價(jià)格飛漲,500ML從原來(lái)的3000-4000元漲到現在7000-8000元,給很多科研單位或機構造成了巨大的壓力,不管是科研單位還是經(jīng)銷(xiāo)商都費勁心機儲備高質(zhì)量的國際進(jìn)口血清。然而前期儲備的較低價(jià)格的進(jìn)口血清總有用完的一天,因此國內相關(guān)單位非常關(guān)注尋求新型的細胞培養基。 但并不是所有的細胞培養需要最高質(zhì)量的胎牛血清, 而且市場(chǎng)上有些培養基完全可以替代昂貴的Life等國際品牌血清。

 

   筆者對哺乳細胞培養過(guò)程中培養基的選擇總結如下心得,以供大家參考:

 

  (1)腫瘤細胞系及懸浮細胞的培養基選擇

 

   腫瘤細胞系是最容易飼養的細胞,對胎牛血清要求不高,甚至用新生牛血清就可以了,沒(méi)有必要用高質(zhì)量的Life或澳洲胎牛血清。比如,四季青、吉泰、WHB等國產(chǎn)牌子的血清完全可以勝任。對于CHO懸浮細胞,甚至不用添加血清,選擇將DMEM作為基本培養基,并添加培養細菌用的有酵母抽提物或植物抽提物就完全可以勝任,超便宜,可以配500 ML不會(huì )超過(guò)100元。

 

  (2)原代哺乳細胞培養基的選擇

 

   對于需要擴增的原代哺乳細胞,比如培養血管內皮細胞,可選擇ScienCell的相關(guān)培養基也要比用Life的血清要便宜。還有一種選擇就是選擇佰通生物的AdvCell哺乳細胞快速擴增培養基,這款培養基特異為原代哺乳細胞分離及快速擴增而設計,配有預選的基本培養基以及血清,并添加有一些細胞因子以彌補血清質(zhì)量差異所造成的影響。這款培養基尤其對于一些擴增速度較慢的原代哺乳細胞非常有效,比如對培養原代成纖維細胞、血管內皮細胞等,效果較好。

 

   在制備轉基因小型豬的過(guò)程中曾用它來(lái)培養增長(cháng)速度及其慢的豬成纖維細胞時(shí),我們發(fā)現若用常規培養基,即使用Life最好的血清也需一個(gè)月細胞密度才能達到80%Confluence,而若用AdvCell哺乳細胞快速擴增培養基,1個(gè)星期細胞就能達到80% confluence, 而且擴增出來(lái)的細胞核型一點(diǎn)問(wèn)題都沒(méi)有,因為我們成功地通過(guò)核移植獲得了轉基因小型豬。

 

   總體來(lái)講,國內血清假貨很多,在沒(méi)有優(yōu)質(zhì)進(jìn)口血清的情況下,選擇合適的低血清細胞培養基的確是一種較好的選擇方案。生產(chǎn)低血清的培養基的廠(chǎng)家國內不是很多,筆者發(fā)現ScienCell以及佰通生物AdvCell系列都有4-5FBS 含量的低血清相關(guān)培養基,而且種類(lèi)也比較多,對需要擴增的細胞基本都能找到相對應的產(chǎn)品。

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