【實(shí)驗目的】
1.了解穿梭箱實(shí)驗(雙向回避實(shí)驗shuttle box test)的原理。
2.掌握穿梭箱實(shí)驗方法。
3.觀(guān)察實(shí)驗動(dòng)物建立條件反射過(guò)程中的學(xué)習、記憶能力。
【實(shí)驗原理】
以光(或聲)、電擊為聯(lián)合刺激,使實(shí)驗動(dòng)物由被動(dòng)回避建立主動(dòng)的條件反射。記錄此條件反射建立過(guò)程中的主動(dòng)回避反應指標可反應實(shí)驗動(dòng)物的學(xué)習、記憶能力的變化。
【實(shí)驗動(dòng)物】
大鼠或小鼠。
【實(shí)驗器材】
穿梭箱由實(shí)驗箱和自動(dòng)記錄打印裝置組成。實(shí)驗箱大小為50cm×l6cm×l8cm。箱底部格柵為可以通電的不銹鋼棒,箱底中央部有一高1.2cm擋板,將箱底部分隔成左右兩側,即安全區和電擊區。實(shí)驗箱頂部有光源或(和)蜂鳴音控制器,自動(dòng)記錄打印裝置可連續自動(dòng)記錄動(dòng)物對電刺激[燈光和(或)蜂鳴器]的反應和潛伏期,并將結果打印出來(lái)。
【觀(guān)察項目】
實(shí)驗動(dòng)物的學(xué)習能力:動(dòng)物反應次數,動(dòng)物主動(dòng)回避次數,動(dòng)物被動(dòng)回避次數,動(dòng)物主動(dòng)回避率。實(shí)驗動(dòng)物的記憶能力:停止訓練5~50天內,分2~3次檢測上述指標。
【實(shí)驗方法與步驟】
1.訓練 先讓動(dòng)物在測試箱中自由活動(dòng)5min,以消除探究反射。將大鼠置于穿梭實(shí)驗箱電擊區。先給予條件刺激(燈光)和(或)蜂鳴音20s,后10s內同時(shí)給以電刺激(電擊強度為30V,50Hz)。如果在亮燈10s內大鼠逃向安全區為主動(dòng)回避反應,電擊后才逃向安全區為被動(dòng)回避反應。經(jīng)過(guò)數次訓練后,大鼠可逐漸形成主動(dòng)回避性條件反應,從而獲得記憶。每次訓練20s,共訓練30~50次。即設定循環(huán)次數為30~50次。
2.測試 做實(shí)驗時(shí),將大鼠置于穿梭箱電擊區,記錄遭受電擊的次數(被動(dòng)回避的次 數),該值與設定循環(huán)次數之差即為主動(dòng)回避次數;刺激時(shí)間(指動(dòng)物在被動(dòng)回避過(guò)程中受到電刺激的時(shí)間和),該值越小,說(shuō)明動(dòng)物主動(dòng)回避反應越迅速。
【注意事項】
1.保持實(shí)驗室安靜,光線(xiàn)不宜過(guò)強,盡量避免給動(dòng)物額外刺激。
2.實(shí)驗中應及時(shí)清除銅柵上的糞便等雜物,以免影響刺激鼠的電流強度。
3.動(dòng)物在24h內有其活動(dòng)周期,故每次實(shí)驗應選擇同一時(shí)間(上午8~12點(diǎn)或下午1~4點(diǎn)),前后2天的實(shí)驗要在同一時(shí)間內完成。
【對穿梭箱實(shí)驗方法的評價(jià)】
簡(jiǎn)單易行,但動(dòng)物的反應差異性較大,只能用于初篩實(shí)驗。