人臍動(dòng)脈平滑肌細胞培養可以：（1）獲得人臍動(dòng)脈平滑肌細胞；（2）作為重大動(dòng)脈疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）對血管疾病的藥理學(xué)和治療繼續提供信息。

     實(shí)驗方法原理

     運用消化法進(jìn)行人臍動(dòng)脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀(guān)察和用免疫組化對培養細胞進(jìn)行鑒定。

     實(shí)驗材料

     臍帶

     試劑、試劑盒

     膠原酶消化液   胰蛋白酶   膠原酶   彈性蛋白酶   DMEM

     儀器、耗材

     眼科剪   滴管   離心機   培養皿   CO2培養箱

     實(shí)驗步驟

     一、實(shí)驗步驟

     1.  冰冷無(wú)菌D-Hanks’液中漂洗，用眼科剪仔細清除脂肪、包膜、血管等組織，轉入青霉素小瓶中，加入少量無(wú)菌D-Hanks’液，用眼科剪剪成0.1-1.0 mm3 大小的碎片。

     2.  用滴管輕輕吸出上層細小脂肪碎塊和油滴，再用無(wú)菌D-Hanks’液反復清洗8~10 次。

     3.  加入 10 倍體積無(wú)菌膠原酶消化液(1  mg/mL)，室溫消化30 min，1000 rpm離心 5 min，棄上清，加1 mg/mL胰蛋白酶 37℃消化 20 min，再次離心5 min，棄上清。

     4.  加入胰蛋白酶 37℃消化20 min，再次離心5 min，棄上清。

     5.  加膠原酶(1 mg/mL)彈性蛋白酶(0.5 mg/mL) 混合消化液 37℃消化 20 min，再離心5 min，棄消化液。

     6.  加混合消化液 37℃消化 20 min，再次離心 5 min，細胞加含 10% FBS的DMEM培養基重懸，轉入培養皿 37℃、5% CO2培養箱中培養即可。