重組人α2a/α2b干擾素生產(chǎn)流程中不可缺少的一環(huán)是產(chǎn)品的質(zhì)量監控，通常采用的是HEp-2/VSV或Wish/VSV系統檢測干擾素的生物活性。此系統常由于VSV或細胞的影響而不夠穩定，且檢測周期較長(cháng)。

實(shí)驗方法原理
      選用2種針對rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b分子不同表位的McAb，1種McAb作為包被抗體，另1種McAb標記辣根過(guò)氧化物酶（HRP）作為結合物，催化底物顯色。根據標準品OD值繪制標準曲線(xiàn)，在標準曲線(xiàn)上查出待檢標本的含量。

實(shí)驗材料
      包被抗體   酶標抗體   標準品   ABTS底物
      試劑、試劑盒
      緩沖液   洗滌液   稀釋液   終止液
      儀器、耗材
      ELISA板

實(shí)驗步驟
      1.  向ELISA板中加入稀釋好的包被抗體100 μl/孔，4 ℃  24～48 h
      2. 洗3次，加入10倍連續稀釋的待測標本（做4個(gè)稀釋度即可）或倍比稀釋的標準品（6個(gè)稀釋度）100 μl/孔，37 ℃，1 h
      3.  洗3次，加入稀釋好的酶標抗體100 μl/孔，37 ℃，45 min
      4.  洗4次，加入配好的ABTS底物液100 μl/孔，RT，30 min       
      5.  測410 nm OD
      6.  繪標準曲線(xiàn)

注意事項
      1.  待檢標本必須無(wú)污染，無(wú)溶血。
      2.  標本稀釋后加入ELISA板時(shí)，注意從低濃度向高濃度依次加入。       
      3.   結合物稀釋液和底物緩沖液中禁止加入疊氮鈉。

   （本文轉載丁香園）