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微生物檢查中的MPN 法和CFU法

     MPN most probable number)法即最近似數法,也稱(chēng)為最大可能數法,是食品檢驗中常用的方法。其生化反應基礎為乳糖發(fā)酵,革蘭陰性菌的無(wú)芽胞桿菌,如大腸菌群,一般在37℃、24h 發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣。利用此原理,將供試液加到發(fā)酵培養基中,37℃ 培養24h.若不產(chǎn)氣,則報告控制菌陰性;若產(chǎn)氣,則需劃線(xiàn)接種于平板上,37℃培養24h 后,觀(guān)察菌落形態(tài)、革蘭染色和重發(fā)酵驗證。


     優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)便、靈敏度較高,時(shí)間短,可直接觀(guān)察試管得出結論,若發(fā)酵培養基不產(chǎn)氣,24h 即可報告控制菌陰性。


     缺點(diǎn):要求樣品具有均一性,適合檢驗液體樣品,且只能用于檢驗在發(fā)酵培養基中產(chǎn)氣的菌種。注意事項:需選擇合適的稀釋度和接種量。


     CFUcolony forming units)法即平板計數法,是食品和藥品檢驗中常用的方法。原理為lg lml 樣品中所含的活菌數量,通過(guò)將處理后的樣品在一定條件下培養后計算生長(cháng)出來(lái)的菌落數(CFU),即在一定體積的細菌培養液在固態(tài)培養基上形成的菌落數。液體樣品可直接稀釋成供試液,固體樣品需在滅菌的生理鹽水中浸泡制成供試液。將不同稀釋度的供試液吸取lml,放入滅菌的平皿內,再傾注融化的營(yíng)養瓊脂,待瓊脂凝固后,翻轉平皿,37℃培養4d,計算平皿內的菌落數。CFU法應用廣泛,但檢驗過(guò)程必須嚴格無(wú)菌,以防污染雜菌,而且檢驗所需時(shí)間較長(cháng),同時(shí)也需選擇合適的稀釋度和接種量。

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