1981年Miesfeld從人類(lèi)基因文庫中發(fā)現一段長(cháng)約2-10個(gè)核苷酸片段，他將這一小段核苷酸片段命名為“微衛星”(microsatellite,MS)。人體在正常狀態(tài)下，微衛星的長(cháng)度和排序保持不變，并且穩定遺傳。但在某些因素作用下，微衛星的 DNA在復制過(guò)程中由于滑動(dòng)等因素，導致雙鏈分子的堿基發(fā)生錯配、插入或缺失，引起微衛星的結構發(fā)生改變，這種結構上發(fā)生改變的微衛星就叫做微衛星不穩定性(microsatellite instability,MSI)。近年來(lái)的研究表明，微衛星不穩定性尤其是高度微衛星不穩定性與許多腫瘤的發(fā)生和發(fā)展關(guān)系密切。研究認為微衛星不穩定性在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用，是腫瘤形成又一機制。

   在正常人體細胞內，微衛星的分子結構保持穩定不變，其原因是在人體細胞內有一種能夠修復微衛星的安全保障體系，這種安全保障體系是由一系列特異性修復微衛星堿基錯配的酶分子組成，叫做微衛星錯配修復系統(mismatch repair system,MMR)。人體細胞中由于錯配修復系統系統的存在，才能避免遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，保證DNA復制的高保真度。  

   微衛星突變后會(huì )使正常細胞向惡性腫瘤細胞轉化，最終發(fā)生惡性腫瘤。進(jìn)一步的研究表明，很多腫瘤的發(fā)生如肺癌、食道癌、膀胱癌、胃癌、甲狀腺癌??等均與微衛星不穩定性密切相關(guān)。在對多種癌組織進(jìn)行微衛星不穩定性檢測后發(fā)現，其微衛星不穩定性的突變率明顯增高。在遺傳性非息肉性結直腸癌（HNPCC）中微衛星不穩定性的突變率可高達70-90%，散發(fā)性大腸癌微衛星不穩定性的突變率也高達28.85%。因此，微衛星不穩定性的檢測已經(jīng)成為篩選惡性腫瘤的重要診斷指標。

   目前臨床上微衛星不穩定性的檢測主要利用免疫組化或多聚酶鏈反應方法，檢測項目有MLH1、MSH2、MSH6和PMS2。 

   微衛星不穩定性檢測的意義：  1、 判斷預后：目前大量證據表明，錯配修復基因缺失/高度微衛星不穩定性是Ⅰ期結直腸癌患者預后良好的一個(gè)標志物。 2、  指導治療：一項回顧性研究結果顯示，高度微衛星不穩定患者 并不能從5-FU的輔助化療中獲益。如果考慮氟尿嘧啶類(lèi)單藥治療，推薦行MMR檢測。  3、 幫助篩選Lynch綜合征：Lynch綜合征，既往亦稱(chēng)遺傳性非息肉性結腸癌，是一種常染色體顯性遺傳病。由于MMR基因發(fā)生胚系突變所致，約占所有結直腸癌的3-5%。  總之，高度微衛星不穩定性檢測對于結直腸癌患者的預后判斷和治療指導具有重要意義。

舉例：

大腸癌微衛星不穩定性

   1.標本收集和基因組DNA提?。鹤哉憬t科大學(xué)第二附屬醫院腫瘤科1996年3月～1997年5月間經(jīng)病理證實(shí)的大腸癌患者60例，男37例，女23例。年齡32～78歲，平均年齡(56±12)歲。按Dukes分期標準，Ⅰ～Ⅱ期33例，Ⅲ～Ⅳ期27例?，F場(chǎng)取手術(shù)切除組織標本，立即置入液氮中保存，直至提取基因組DNA。每份標本包括腫瘤組織和相應的正常腸粘膜，基因組DNA提取采用蛋白酶k消化，酚氯仿抽提法。

   2.MI檢測：選用了D2S119、D13S160、D8S282、D3S1293、D2S123和D18S58等6個(gè)微衛星位點(diǎn)進(jìn)行檢測，PCR反應體系為50 mmol/L KCl,10 mmol/L Tris-Cl, 0.1%Trito X-100, 1.5 mmol/L MgCl2,200 μmol/L dNTPS,模板DNA200 ng，上下游引物各50 pmol，Taq酶1U，加去離子水至50 μl。PCR反應參數為：94℃變性5分鐘，然后進(jìn)入循環(huán)(94℃ 45秒，退火溫度30秒，72℃ 1分鐘)，共35個(gè)循環(huán)，最后70℃延伸10分鐘，4℃保存。PCR產(chǎn)物用8%變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，電泳結束后進(jìn)行銀染。

   3.判斷標準：分析電泳圖譜，MI表現為腫瘤組織相對于正常組織出現額外的條帶、等位帶產(chǎn)生遷移率的改變或等位帶濃度增加。在檢測的6個(gè)微衛星位點(diǎn)中，如果有兩個(gè)或兩個(gè)以上位點(diǎn)表現MI，則定義為RER陽(yáng)性。    

   4.統計處理：采用t檢驗、χ2檢驗和Fishers確切概率法，檢驗水準（α）定為0.05，統計在SPSS 6.0軟件上完成。   

結果