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四大酵母培養基的配置

一、目的要求
      了解合成培養基、半合成培養基和天然培養基的配制原理?! W(xué)習和掌握麥芽汁培養基、馬鈴薯葡萄糖培養基、豆芽汁葡萄糖培養基和察氏培養基的配制方法。
二、基本原理
      麥芽汁培養基和馬鈴薯葡萄糖培養基被廣泛用于培養酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養基有時(shí)也可用于培養放線(xiàn)菌。豆芽汁葡萄糖培養基也是培養酵母菌及霉菌的一種優(yōu)良培養基。察氏培養基主要用于培養霉菌觀(guān)察形態(tài)用。麥芽汁培養基為天然培養基,馬鈴薯葡萄糖培養基和豆芽汁葡萄糖培養基二者均為半合成培養基,而察氏培養基則為合成培養基。培養基配方中出現的自然pH系指培養基不經(jīng)酸、堿調節而自然呈現的pH。
三、實(shí)驗材料

      (一)  藥品   葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,FeS04、瓊脂。   

     (二)  儀器   天平、高壓蒸汽滅菌鍋。    

      (三)  玻璃器皿   移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養皿、玻璃漏斗等。    

      (四)  其他物品   藥匙、pH試紙、稱(chēng)量紙、記號筆、棉花、紗布、線(xiàn)繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。

四、實(shí)驗內容
(一)  麥芽汁培養基的配制
1.培養基成分   新鮮麥芽汁一般為10-15波林。
2.配制方法

      (1)  用水將大麥或小麥洗凈,用水浸泡6-12h,置于15℃陰涼處發(fā)芽,上蓋紗布,每日早、中、晚淋水一次,待麥芽伸長(cháng)至麥粒的兩倍時(shí),讓其停止發(fā)芽,曬干或烘干,研磨成麥芽粉,貯存備用。     

      (2)  取一份麥芽粉加四份水,在65℃水浴鍋中保溫3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如無(wú)藍色出現,即表示糖化完全)。     

      (3)  糖化液用4-6層紗布過(guò)濾,濾液如仍混濁,可用雞蛋清澄清(用一個(gè)雞蛋清,加水20 ml,調勻至生泡沫,倒入糖化液中,攪拌煮沸,再過(guò)濾)。     

      (4)  用波美比重計檢測糖化液中糖濃度,將濾液用水稀釋到10-15波林,調pH至6.4。如當地有啤酒廠(chǎng),可用未經(jīng)發(fā)酵,未加酒花的新鮮麥芽汁,加水稀釋到10-15波林后使用。     

      (5)  如配固體麥芽汁培養基時(shí),加入2%瓊脂,加熱融化,補充失水。     (6)  分裝、加塞、包扎。     (7)  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。

(二)  馬鈴薯葡萄糖培養基的配制

      1.培養基成分     馬鈴薯   20g     葡萄糖   2 g     瓊脂    1.5-2g     水     100ml     自然pH  

      2.配制方法  (1)  配制20%馬鈴薯浸汁  取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1000ml。80℃浸泡lh,用紗布過(guò)濾,然后補足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20%馬鈴薯浸汁,貯存備用。     (2)  配制時(shí),按每100 ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖,加熱煮沸后加入2g瓊脂,繼續加熱融化并補足失水。     (3)  分裝、加塞、包扎。     (4)  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。

(三)豆芽汁葡萄糟培養基的配制
      1.培養基成分     黃豆芽   10g     葡萄糖   5g     瓊脂    1.5-2g     水     100ml     自然pH    2.配制方法  (1)  稱(chēng)新鮮黃豆芽10g,置于燒杯中,再加入100 ml水,小火煮沸30 min,用紗布過(guò)濾,補足失水,即制成10%豆芽汁。     (2)  配制時(shí),按每100 ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g瓊脂,繼續加熱融化,補足失水。     (3)  分裝、加塞、包扎。     (4)  高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。
(四)察氏(czapck)培養基的配制

      1.培養基成分     蔗糖       3g     NaN03     0.3g     K2HP04      0.1g     KCl        0.05g     MgSO4·7H2O     0.05 g     FeS04      0.001 g     瓊脂      1.5-2g     蒸餾水     100ml     自然pH       

      2.配制方法  (1)  稱(chēng)量及溶化  量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中,分別稱(chēng)取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養基加入1ml 0.1%的FeS04溶液。     (2)  定容  候藥品全部溶解后,將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。     (3)  加瓊脂  加入所需量瓊脂,加熱融化,補足失水。     (4)  分裝、加塞、包扎。     (5)  高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

五、實(shí)驗報告內容

      記錄你所配制培養基的名稱(chēng)及成分。

      (本文轉載:丁香通

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