材料：

   1. 緩沖液和溶液：氯仿；NaCl（固體）；聚乙二醇（PEG 8000）；SM

   2. 酶和緩沖液：胰Dnase I (1mg/ml)；胰Dnase I (1mg/ml)于TE中（ph7.6）

   3. 離心機和轉子：Sorvall  GSA 轉子或相當型號

   4. 專(zhuān)用設備：量筒（2L）

   5. 載體和菌株：大腸桿菌培養物，經(jīng)λ噬菌體感染和裂解

   方法：

   用PEG沉淀噬菌體顆粒：

   1、將含有λ噬菌體的裂解培養物冷卻至室溫，加胰Dnase I和Dnase 至終濃度約為1μ g/ml，室溫溫育30min。

   2、每500ml培養物加入29.2固體NaCl（終濃度為1mon/L），攪拌使其溶解。將培養物冰浴1h。

   3、4℃，11000g（8300r/min于Sorvall GSA轉子中）離心10min以去除細胞碎片，將四份培養物的上清混合置于2L的干凈量筒中。

   4、測定所收集上清的總體積，然后轉移至2L的燒瓶中，加固體PEG至終濃度為10%（m/V，加500ml上清加50gPEG），于室溫用磁力攪拌器慢慢攪拌溶解PEG。

   5、將噬菌體/PEG溶液轉移至聚丙烯離心管中，于冰水浴冷卻，至少放置1h以便使噬菌體顆粒發(fā)生沉淀。

   6、4℃，11000g（8300r/min于Sorvall GSA轉子中）離心10min以回收沉淀的噬菌體，去上清，將離心管倒過(guò)來(lái)傾斜放置5min，以便是剩余液體充分流干。用移液器吸取殘余的液體。

   用氯仿抽提細菌碎片：

   7、用一帶橡皮球的寬口吸干將噬菌體沉淀輕輕地重懸于SM中（針對步驟3每500ml上清加8ml SM），將離心管傾斜放置，使SM完全覆蓋并浸泡噬菌體沉淀，室溫放置1h。

   通過(guò)加入等體積的氯仿抽提噬菌體懸浮液中的PEG和細胞碎片，溫和振蕩30s。4℃，3000g（4300r/min于Sorvall GSA轉子中）離心15min以分離有機相和親水相，回收含噬菌體顆粒的親水相。